小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒優(yōu)勢:
1.快速提?。?5分鐘快速基因組DNA提取,無(wú)需組織裂解試劑,實(shí)驗過(guò)程無(wú)需調pH值、離心;
2.快速分型擴增:45分鐘快速高效擴增;
3.擴增試劑:分熱啟動(dòng)型和非熱啟動(dòng)型兩種,含有染料,擴增后可直接電泳;
4.減少繁瑣步驟,降低污染風(fēng)險;
5.高通量操作:可在PCR儀上批量處理樣本;
6.擴增產(chǎn)物末端加A,且可進(jìn)行下游酶切、測序等;
7.節約成本,提取+擴增,合計低于6元。
小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒 操作步驟:
1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?,用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
120 ng/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
60 ng/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
30 ng/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
15 ng/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
7.5 ng/L1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
4.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。
5.測定:以空白空調零,450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。